第二部分 实验内容

实验一 茯苓多糖、猪苓多糖和淀粉的水解和鉴定

（一）茯苓多糖和猪苓多糖的水解和鉴定

【原理】

茯苓多糖、猪苓多糖，分别是中药茯苓和猪苓的主要成分。茯苓多糖是含有β-1,3糖苷和β-1,6糖苷键的葡聚糖。猪苓多糖是水溶性多聚糖。它们经浓硫酸脱水产生糠醛或糠醛衍生物，它们在浓无机酸作用下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物（Molish反应）。

茯苓多糖和猪苓多糖都是无还原性多糖，当它们用酸水解后，则生成还原性单糖。利用班氏试剂与其作用，可分别生成氧化亚铜砖红色沉淀，以反映其水解。

【操作】

（1）分别取2%茯苓悬浊液和2%猪苓悬浊液1mL置于小试管中，加莫氏（Molish）试剂3滴，混匀，将试管倾斜，沿管壁逐滴加入浓硫酸15滴，慢慢直立试管，观察两层处有否紫红色环出现。

（2）分别取2%茯苓悬浊液2mL置试管内，加浓盐酸10滴，置沸水浴中10分钟，然后加20%NaOH中和之（用pH试纸检测），此即为两种不同的水解液。

（3）取试管4支，编号，按表2-1-1加入试剂。

混匀，置沸水浴中3～5分钟，观察其变化并解释之。

【试剂】

（1）2%茯苓悬浊液：称取1g茯苓粉，加水调匀，倾入沸水，边加边搅，总水量为100mL，煎煮至50mL。

（2）2%猪苓悬浊液：制备方法同茯苓悬浊液。

（3）莫氏（Molish）试剂：称取α-萘酚5g溶于95%酒精中，并稀释到100mL，需新鲜配制。

（4）浓硫酸。

（5）浓盐酸。

（6）20%NaOH溶液。

（7）pH试纸。

（8）班氏试剂：取硫酸铜（CuSO4·5H2O）17.3g溶于100mL水中，另以柠檬酸钠173g，无水碳酸钠100g溶于700mL水中。将上述两溶液合并，用水稀释至1000mL。

（二）淀粉的水解和鉴定

【原理】

淀粉是多糖，由多个葡萄糖分子聚合而成，它遇碘呈蓝色（在中性或酸性环境中）。淀粉在酸或酶的作用下，水解成不同程度的寡糖，最终水解为葡萄糖（或麦芽糖）。后者具有还原性，可使碱性硫酸铜还原生成砖红色或棕黄色的氧化亚铜沉淀。通过单糖的还原作用可判断多糖的水解。其反应过程如下：

淀粉 →糊精 →麦芽糖 →葡萄糖

【操作】

取1%淀粉液10mL置于小烧杯内，加入浓盐酸8滴，放在石棉网上加热，每隔2分钟，用滴管取出1小滴放在白瓷板上，加碘液1滴，观察其颜色，直到无蓝色为止。然后取下烧杯，加入20%NaOH中和，加入盐酸（用pH试纸检测）。再取试管2支，编号，按表2-1-2加入试剂。

置沸水浴中3分钟，观察颜色变化并解释之。

【附注】

氧化亚铜沉淀由于其沉淀速度、颗粒大小不同而有颜色的差别，颗粒大的为红色，颗粒小的为黄色。

【试剂】

（1）1%淀粉液：称取淀粉（AR）1g置于烧杯内，加水100mL，边加热边搅拌，呈透明溶液为止。

（2）碘试剂：称取碘化钾20g及碘10g溶于100mL水中。使用时再稀释10倍。

（3）班氏试剂：同前。

（4）浓盐酸。

（5）20%NaOH溶液。

（6）pH试纸。