四、无菌生产工艺

无菌生产工艺系指必须在无菌控制条件下生产无菌制剂的方法，无菌分装及无菌冻干是最常见的无菌生产工艺，后者在工艺过程中须采用过滤除菌法。采用无菌生产工艺时，应严密监控其生产环境的洁净度，并对无菌操作过程进行严格控制，包括对操作人员的卫生要求，对相关设备、包装容器、胶塞等应采用适当的方法进行灭菌，并防止被再次污染。无菌生产工艺应定期进行验证，包括对环境空气过滤系统有效性验证及培养基模拟灌装试验。

在药物制剂中，将一些不耐热的药物制成注射剂、眼用溶液、眼用软膏、皮试液等时，往往采用无菌生产工艺制备。按无菌生产工艺制备的产品，最后一般不再灭菌，但必须经过无菌检查法(见《中国药典》)检验证实已无微生物生存后，方能使用。

(一)无菌操作室的灭菌

无菌生产工艺所使用的一切用具、材料以及环境，均需选择适宜的方法灭菌，操作须在无菌操作室或无菌柜内进行。

无菌室的灭菌多采用灭菌和除菌相结合的方式实施。对于流动空气采用过滤除菌法除菌；对于静止环境的空气采用灭菌方法灭菌。常用空气灭菌法有丙二醇或三甘醇蒸气熏蒸法，过氧乙酸熏蒸法，紫外线空气灭菌法等。近年来利用臭氧进行灭菌，代替紫外线照射与化学试剂熏蒸灭菌，取得了令人满意的效果，是在《GMP验证指南》消毒方法中被推荐的方法。该法将臭氧发生器安装在中央空调净化系统送、回风总管道中与被控制的洁净区采用循环形式灭菌。臭氧灭菌法特点：①不需增加室内消毒设备；②可以使臭氧迅速扩散到洁净室的每个角落，臭氧浓度分布均匀，因而对空气中的浮游菌及设备、建筑物表面的沉降菌落都能消毒；③对空气净化过滤系统滋生的霉菌和杂菌起到了杀灭作用；④灭菌时间短(一般只需1h)、操作简便、效果好。

除定期进行较彻底的灭菌外，还要对室内的空间、用具、地面、墙壁等，用3%苯酚溶液、2%煤酚皂溶液、0.2%苯扎溴铵溶液或75%乙醇喷洒或擦拭。其他用具尽量用热压灭菌法或干热灭菌法灭菌。每天工作前开启紫外线灯1h，中午休息也要开0.5～1h，以保证操作环境的无菌状态。

(二)无菌操作

1.在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。

2.执行无菌操作前，先戴帽子、口罩，洗手，并将手擦干，注意空气和环境清洁。

3.夹取无菌物品，必须使用无菌持物钳。

4.进行无菌操作时，凡未经消毒的手、臂均不可直接接触无菌物品或超过无菌区取物。

5.无菌物品必须保存在无菌包或灭菌容器内，不可暴露在空气中过久。无菌物品与非无菌物品应分别放置。无菌包一经打开即不能视为绝对无菌，应尽早使用。凡已取出的无菌物品虽未使用也不可再放回无菌容器内。

6.无菌包应按消毒日期顺序放置在固定的柜橱内，并保持清洁干燥，与非灭菌包分开放置，并经常检查无菌包或容器是否过期，其中用物是否适量。

7.无菌盐水及酒精、新洁尔灭棉球罐每周消毒一次，容器内敷料如干棉球、纱布块等，不可装得过满，以免取用时碰在容器外面被污染。

少量无菌制剂的制备，普遍采用单向流洁净工作台进行无菌操作，使用方便，效果可靠，为无菌操作创造了良好的条件。